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大鼠去甲肾上腺素转运蛋白(NET)ELISA试剂盒

操作注意事项：
1、 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2、 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3、 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4、 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5、 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6、 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
7、加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
8、按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

大鼠去甲肾上腺素转运蛋白(NET)ELISA试剂盒操作过程主要步骤总结如下：
稀释--加样--温育--配液--洗涤--加酶--温育--洗涤--显色--终止--测定

详细操作步骤如下：
1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3.  样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

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