?产品名称：鱼类超敏C反应蛋白（hs-CRP）ELISA试剂盒子科供应

?英文名称：Fish high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit

?产品规格：96T（人份）/48T（人份）（单孔检测分别可以检测90份样本，42分样本，一般都需要留6个孔做标准曲线）。

?检测方法：酶联免疫分析ELISA方法

?有效期： 4 个月(4℃)；8 个月（-20℃）。

?保存方法： 2-8℃（频繁使用时）; -20℃（长时间不用时）。

?品牌：子科生物ZIKER

?质量保证：我告诉所有产品均需要经过质检通过后，才允许出库！

?适用范围：实验结果仅供科研参考，不推荐用于临床诊断结果。

?ELISA常用的方法：双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等，子科生物ELISA产品主要用双抗体夹心法。

?标本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等

?产品性能：灵敏度高，特异性强，重复性。

?产品包装：盒（KIT）（含试剂+酶联板+覆膜等）

?检测范围：详细请咨询在线客服或拨打销售苏经理。

鱼类超敏C反应蛋白（hs-CRP）ELISA试剂盒子科供应

实验测定具体步骤：

1．确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目，并增加 1 孔作为 TMB 空白显色孔。 总数=样品数+9；做双份检测时×2。其余重包装好放如冰箱中。

2．将标准品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中，1 孔只加样品稀释液的作为零孔。对于血清、体液、 组织匀浆或细胞培养上清，直接加已用样品稀释液稀释的样品 100μ ι 。

3．酶标板加上盖，37℃反应 90 分钟。

4．反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体；或甩去酶标板内液体，再对着吸水纸拍几下。 不洗。

5．将准备好的生物素抗体工作液按每孔 0.1ml 依次加入。（TMB 空白显色孔除 外）。37℃反应 60 分钟。

6． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗涤 3 次，每次浸泡 1 分钟左右。

7．将准备好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入（TMB 空白显色孔除外）。37℃反应 30 分钟。

8． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗涤 5 次，每次浸泡 1-2 分钟左右。

9．按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分钟的 TMB 显色液，37℃避光反应 20-25 分钟 （注意：显色时间供参考，因用户实验室条件差异，显色时间会有所不同。此时肉眼可 见标准品的前 3-4 孔有明显的梯度蓝色，后 3-4 孔差别不明显）。

10．按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 终止液，此时蓝色立转黄色。

11．用酶标仪在 450nm 测定 O.D.值。

有两种设定空白对照的方案：

（1）将 TMB 空白显色孔设为对照。所有的标准品和样品的吸光值减去 TMB 空白显色孔的 吸 光 值 后 ， 在 坐 标 纸 上 画 出 曲 线 ， 以 吸 光 值 作 为 纵 坐 标 ， 以 浓 度 作 为 横 坐 标 。

（2）将零孔设为对照。所有的标准品和样品的吸光值减去零孔的吸光值后，得到的数据可以 直接在坐标纸上画出曲线。

样品稀释的一般原则

用户须估计样品待测因子的含量，决定适当的稀释倍数，以使稀释后样品中待测因子的浓度 处于 ELISA 试剂盒的检测范围。根据待测因子含量高、中、低的不同，分别采取不同的稀释方案：

高：指待测因子在 20-200ng/ml。一般按 1：100 稀释。297μ ι 样品稀释液加 3μ ι 样品。

中：指待测因子在 2-20ng/ml。一般按 1：10 稀释。225μ ι 样品稀释液加 25μ ι 样品。

低：指待测因子在 31.2→2000pg/ml。按 1：2 稀释。100μ ι 样品稀释液加 100μ ι 样品。

特低：指待测因子≤31.2pg/ml。样品一般不做稀释，按每孔 100μ ι 样品直接加入。

以上方案仅供参考，样品的稀释应有详细记录。

鱼类超敏C反应蛋白（hs-CRP）ELISA试剂盒子科供应注意：客户收到我公司产品请 时间确认试剂盒是否有破损，酶标板是否封闭，使用前 TMB显色液应为无色透明溶液，若发现颜色异常，或者其他问题请及时与我司售后人员进行联系，我们会 次安排进行退换。

封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染，底物请避光保存。使用之后所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理，以免造成污染！

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