?产品名称：鱼类甲状腺素（T4）ELISA试剂盒子科现货供应

?英文名称：Fish Thyroxine,T4 ELISA Kit

?产品规格：96T（人份）/48T（人份）（单孔检测分别可以检测90份样本，42分样本，一般都需要留6个孔做标准曲线）。

?检测方法：酶联免疫分析ELISA方法

?有效期： 4 个月(4℃)；8 个月（-20℃）。 

?保存方法： 2-8℃（频繁使用时）; -20℃（长时间不用时）。 

?品牌：子科生物ZIKER

?质量保证：我告诉所有产品均需要经过质检通过后，才允许出库！

?适用范围：实验结果仅供科研参考，不推荐用于临床诊断结果。

?ELISA常用的方法：双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等，子科生物ELISA产品主要用双抗体夹心法。

?标本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等

深圳子科生物自主研发酶联免疫分析检测试剂盒，品牌为ZIKER,可以检测 Human，Rat、Mouse、Porcine、Sheep、Monkey、Goat、Bovine、Canine、Rabbit、Chicken、Duck、Fish、Plant 等各种样本，品种齐全，质量保证，免费代测、技术全程支持服务，我公司长期跟各大高校科研实验室保持课题合作，经验丰富，质量稳定！我们所有的产品都是我司直接供货，无中间差价，直接供货，让您以*惠的实验预算完成您的实验！

鱼类甲状腺素（T4）ELISA试剂盒子科现货供应试剂盒组成及试剂配制

1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。

2. 标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。

3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

实验原理

用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

标本的采集及保存

1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过了夜后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.细胞培养物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：标本溶血会影响*检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

鱼类甲状腺素（T4）ELISA试剂盒子科现货供应操作步骤

实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。

1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。

为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。

3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。

4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液） 100μl，37℃，60分钟。

5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7.依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。

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